DETALLES DEL PROYECTO

RESPONSABLE(S):

Nancy Moreno de Martínez

TITULO DEL PROYECTO

Marcadores microsatélite (STR) del cromosoma Y DYS19, DYS390, DYS391, DYS392 y DYS393 y con importancia en identificación humana y en estudios clínicos

FACULTAD A LA QUE PERTENECE

Ccs.de la Salud

ACTIVIDAD DEL ARTICULO 42 DE LA LOCTI CON LA CUAL SE RELACIONA EL PROYECTO

Ordinal 8, Aparte a

PROBLEMA DEL PROYECTO

En los últimos años se ha producido un incremento progresivo en el análisis de los microsatélites del cromosoma ¿Y¿ los cuales se caracterizan por tener secuencias repetidas en tandem, que se diferencian de un individuo a otro, por lo tanto estos marcadores son altamente polimórficos y presentan un interés cada vez creciente en identificación humana, en el campo de la Genética de Poblaciones y en clínica. Entre los principales microsatélites que han sido analizados en diversas poblaciones se encuentran los identificados como: DYS19, DYS390, DYS391, DYS392 y DYS393. (Gavrilidis y Ashdown, 2001; Kayser y cols., 2001; Arce y cols., 2000 Lara y cols., 2000; Pérez-Lezaun y cols. 1997; Yunis y Yunis, 2000). Para cada uno de estos marcadores existe un número determinado de alelos, los cuales se les denomina de acuerdo al tamaño del producto PCR expresado en pares de bases (pb); por ejemplo, para DYS19, cuyo motivo de repetición es un tetranucleótido (GATA), se han identificado hasta el momento seis alelos, cuyos tamaños oscilan entre 186 y 210 pb.; en consecuencia los alelos para este sistema se les conoce como: 186, 190, 194, 202, 206 y 210. Para que un marcador genético pueda ser utilizado en identificación humana debe ser evaluado y uno de los parámetros requeridos para tal efecto es la determinación de las frecuencias de los alelos del marcador en estudio. El conocimiento de las frecuencias alélicas permite establecer los haplotipos de los STR del cromosoma ¿Y¿, éste término se refiere a las diferentes combinaciones en las cuales se presentan los alelos de un conjunto de microsatélites analizados en una muestra poblacional determinada. Los haplotipos del cromosoma Y tienen una utilidad comprobada en los estudios de de afinidad genética entre grupos poblacionales masculinos. Por otra parte las bases de datos de frecuencias del cromosoma Y constituyen una herramienta necesaria para el tratamiento estadístico de los datos en los estudios de identificación humana, tanto de filiación como en criminalística. Los haplotipos del cromosoma maculino han sido determinados en diversas poblaciones por ejemplo en: Australia (Gavrilidis y Ashdown 2001), Alemania (Schmidt y cols., 2003), Italia (Cerutti y cols., 2006), Brasil (Silva y cols., 2006) Sur África (Kido y cols., 2006) China (Zhu y cols., 2006; Xing y cols., 2006), Japón (Tamura y cols., 2006) y México (Rangel-Villalobos y cols., 2000). Kayser y cols. (2001) estudiaron una muestra poblacional integrada por 986 individuos de diferentes partes del mundo, se lograron identificar 598 haplotipos. Un nutrido grupo de investigadores de varios países, elaboraron una base de datos de referencia sobre haplotipos de STR del cromosoma ¿Y¿, la cual se encuentra disponible en Internet (Roewer y cols., 2001). Varios grupos de investigadores en Latinoamérica, han estado trabajando en la generación de bases de datos sobre microsatélites tanto de cromosomas autosómicos como los sexuales; con el fin de ser utilizados como sistemas de referencia en los diferentes casos de identificación humana. En este aspecto resaltan los resultados publicados por Corach y cols. (1997) en población de Argentina; estos autores efectuaron la evaluación de ocho marcadores STR del cromosoma ¿Y¿, los cuales han resultado muy útiles en el campo forense, ya que fueron utilizados en la identificación de personas asesinadas durante el último período dictatorial en Argentina. En Venezuela se ha comenzado a estudiar los microsatélites del cromosoma Y en algunas regiones del país y en este aspecto son muy importantes los estudios realizados en el Zulia (Borjas y cols., 2005, Moreno y cols., 2005; Pardo y cols., 2005) Nueva esparta (González y cols., 2005) Miranda ( Arroyo y Castro De Guerra, 2005) y en Caracas se comenzó a establecer una base de datos de haplotipos de cromosoma Y (Tovar y cols., 2005).

OBJETIVOS DEL PROYECTO

.-Objetivo General: Generar conocimiento sobre los polimorfismos de ADN de los marcadores microsatélites: DYS19, DYS390, DYS391, DYS392 y DYS393 en una muestra de individuos no relacionados biológicamente, residentes en el Estado Aragua, con el fin de: Formar una base de datos que tenga aplicación en identificación humana. Disponer de ensayos que proporcionen información en la discusión de casos clínicos de pacientes con problemas de determinación de sexo. .-Objetivos Específicos: 1.- Obtener un banco de muestras de ADN de buena calidad de la población en estudio. 2.-Identificar los alelos de los sistemas DYS19, DYS390 DYS391, DYS392 y DYS393 presentes en los individuos analizados. 3.-Calcular las frecuencias de los alelos para cada sistema y determinar los valores de heterocigosidad. 4.-Determinar los haplotipos.

ACTIVIDADES DEL PROYECTO

SUJETOS Y MÉTODOS: .-Población y muestra. .-Técnicas y procedimientos de recolección de datos. .-Toma de muestra. .-Extracción de ADN. .-Verificación de cantidad y calidad. .-Amplificación de las secuencias respectivas mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa. .-Caracterización de productos amplificados mediante electroforesis en gel de acrilamida al 10%. 1.-Tratamiento de placas, 2.-Preparación del gel, 3.-Aplicación de muestras, 4.-Revelado. .-Análisis estadístico de los datos.

PRODUCTOS DEL PROYECTO

1. Se formará una base de datos de haplotipos del cromosoma Y, la cual además de su importancia en estudios poblacionales, tiene aplicación para efectuar cálculos involucrados en los problemas de identificación humana en población masculina del estado Aragua. Estos datos al ser publicados pueden ser utilizados por cualquier laboratorio público o privado que se dedique a efectuar este tipo de pruebas. 2. Se dispone de ensayos estandarizados para efectuar análisis de polimorfismos de microsatélites del cromosoma Y, en pacientes con problemas de definición del sexo. La información suministrada al geneticista por este tipo de ensayo, es un aporte valioso para el asesoramiento genético. Estos ensayos se realizarán en el Laboratorio de Biología Molecular, por solicitud del Laboratorio de Genética Humana de la Unidad Proyecto Aragua.

DEPENDENCIA RESPONSABLE DEL PROYECTO:

OTRA (especifique)

DEPENDENCIA ESPECIFICA

Facultad de ciencias de la salud - Aragua

FECHA INICIO

01/07/2007

FECHA FIN

30/09/2008

MONTO DEL PROYECTO

Bs. 16.302.000,00, Bs.F. 16.302,00

FINANCIADO POR

  • INDUSTRIAS DE ELECTRODOMESTICOS,C.A. (INELEC), por un monto de: Bs. 16.000.000,00, Bs.F. 16.000,00, en el 2005.

TOTAL APORTE:

Bs. 16.000.000,00, Bs.F. 16.000,00

DEFICIT:

Bs. -302.000,00, Bs.F. -302,00

SUPERAVIT:

Bs. , Bs.F. 0,00
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