DETALLES DEL PROYECTO

RESPONSABLE(S):

Mait Velásquez

TITULO DEL PROYECTO

Evaluación de citoxicidad de fármacos sobre células humanas mediante microscopia de fluorescencia

FACULTAD A LA QUE PERTENECE

Ccs.de la Salud

ACTIVIDAD DEL ARTICULO 42 DE LA LOCTI CON LA CUAL SE RELACIONA EL PROYECTO

Ordinal 9, Aparte b

PROBLEMA DEL PROYECTO

En el Laboratorio de Bioquímica Farmacológica del BIOMED-UC, se han venido desarrollando diversos proyectos de investigación con la finalidad de determinar tanto las posibilidades terapéuticas de nuevos compuestos químicos sintetizados en nuestro país, como los efectos fotosensibilizantes de sustancias de origen natural o sintético. En particular, estamos inmersos dentro del estudio de: (a) Los efectos anti-inflamatorios o antitumorales de complejos organometálicos sintetizados en el Laboratorio de Química Bioinorgánica del Centro de Química del IVIC encabezado por la Dra. Maribel Navarro. (b) Los efectos citotóxicos estimulados por la irradiación con luz visible o ultravioleta sobre fármacos. El propósito esencial es la evaluación de las consecuencias, positivas o adversas, que la combinación luz + droga genera tanto sobre las funciones celulares como sobre la integridad de la membrana plasmática. En todos esos proyectos se contempla el empleo de las técnicas de microscopía de fluorescencia para evaluar los efectos de esos compuestos sobre las viabilidades de células humanas del sistema inmune innato (neutrófilos) y adquirido (linfocitos) y sobre algunas líneas tumorales establecidas. En ese sentido, las viabilidades de las células deben determinarse mediante técnicas tales como las de microscopía de fluorescencia, que posean alta sensibilidad, de bajo costo operacional y que requieran relativamente escasa destreza del usuario. Además, y esto es esencial, la microscopía de fluorescencia permite discriminar de un modo simultáneo entre los eventos tóxicos de apoptosis y de necrosis celular. Tales discriminaciones son importantes debido a que existe el consenso en la comunidad científica, de que los fármacos diseñados para tratar enfermedades autoinmunes o malignas, deben estimular los eventos de apoptosis, mientras que los efectos necróticos son considerados como eventos citotóxicos inespecíficos y no deseados. El problema central que venimos enfrentando tiene que ver con: 1. La ausencia en nuestro Instituto, de microscopios de fluorescencia con dispositivos con capacidad de capturar y fotografiar las imágenes observadas en el microscopio, ya sea para mostrarlas en nuestras presentaciones en Congresos de Investigación o para insertarlas como figuras de los artículos que publicamos en revistas especializadas. 2. El excesivo número de usuarios que tiene el único microscopio de fluorescencia con capacidad operativa dentro del BIOMED. Si a esto añadimos que en nuestro grupo de investigación se han iniciado los experimentos correspondientes a varios proyectos de maestría (4 en total), es fácil prever que la situación empeorará ya que en todos esos proyectos está contemplado el uso de esta técnica. Las consideraciones expuestas en los párrafos precedentes sugieren que la solución a este problema es la adquisición de un microscopio de fluorescencia para labores de investigación que incluya tanto la cámara digital incorporada como el software apropiado para captura de imágenes. En nuestro país existen representantes autorizados que comercializan microscopios de fluorescencia con las especificaciones requeridas que incluyen: A) Operación motorizada, enfoque, procedimientos de observación y control interactivo tanto del microscopio como de la cámara digital. B) Software incorporado que permita operar al microscopio desde una computadora C) Magnificación desde 10X hasta 1500X D) Juego de filtros (cubos) para los fluorocromos FITC (490-520 nm), Cy3 (552-570 nm) y DAPI (372-450 nm).

OBJETIVOS DEL PROYECTO

1.Fortalecer el Instituto de Investigaciones Biomédicas (BIOMED-UC) a través de la adquisición de tecnología de punta en concordancia con las exigencias actuales, aplicable a diferentes líneas de investigación ya establecidas. 2. Elevar el nivel científico-tecnológico de las tesis de maestría y doctorado del postgrado en Ciencias Biomédicas de la Universidad de Carabobo (BIOMED-UC), así como de otros postgrados de universidades nacionales.

ACTIVIDADES DEL PROYECTO

Los Trabajos de Tesis de Maestría actualmente realizadas en el Laboratorio de Bioquímica Farmacológica, que se beneficiarían de inmediato con la adquisición del microscopio de fluorescencia son: 1. Título del Proyecto: ¿Efectos de algunos complejos oro-fosfina sobre los cambios funcionales y de viabilidad provocados por el factor de necrosis tumoral en neutrófilos humanos¿ Tesista: Lic. Mait Velásquez (solicitante del presente proyecto) Institución: Universidad Central de Venezuela, Facultad de Ciencias Veterinarias, Postgrado en Medicina Veterinaria. Mención Microbiologia. 2. Título del Proyecto: ¿Efecto de ciprofloxacina y norfloxacina sobre la apoptosis de neutrófilos humanos en experimentos in vitro¿. Tesista: Lic. Marla Paredes Institución: Universidad Central de Venezuela, Facultad de Ciencias Veterinarias, Maestría en Ciencias Morfológicas. 3. Título del Proyecto: ¿Efecto fotosensibilizante de emodina sobre células mononucleares humanas irradiadas¿ Tesista: Lic. Marianella Moreno Institución: Universidad Central de Venezuela, Facultad de Ciencias Veterinarias, Maestría en Ciencias Morfológicas. 4. Título del Proyecto: ¿Evaluación in vitro de los efectos de diferentes complejos de oro sobre la actividad de la tioredoxina reductasa extraída de placenta humana y sobre funciones mitocondriales relacionadas con eventos apoptóticos¿ Tesista: Lic. José Luis Duque Institución: Universidad de Carabobo, Facultad de Ciencias de la Salud, Área de Postgrado, Maestría en Ciencias Biomédicas. Mención Biología Molecular. Además, el mencionado equipo podrá ser utilizado en varias secciones del BIOMED-UC en las cuales la microscopia de fluorescencia está relacionada con numerosos protocolos. Estas secciones del BIOMED son: a) Laboratorio de Inmunodiagnóstico dirigido por la Prof. María M. Cortéz y Laboratorio Regional de Diagnóstico e Investigación del Dengue y otras enfermedades virales (LARDIDEV) dirigido por el Dr. Guillermo Comach.

PRODUCTOS DEL PROYECTO

1.Fortalecimiento científico-tecnológico del BIOMED-UC y de sus diferentes líneas de investigación. 2. Tesis de maestría y doctorado de alto nivel. 3. Presentación en congresos nacionales e internacionales de los productos de las investigaciones con un alto nivel científico-tecnológico. 4. Publicación de los resultados de las investigaciones relacionadas en revistas especializadas, tanto nacionales como internacionales.

DEPENDENCIA RESPONSABLE DEL PROYECTO:

OTRA (especifique)

DEPENDENCIA ESPECIFICA

Facultad de ciencias de la salud - Aragua

FECHA INICIO

01/04/2007

FECHA FIN

01/04/2008

MONTO DEL PROYECTO

Bs. 140.000.000,00, Bs.F. 140.000,00
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