DETALLES DEL PROYECTO

RESPONSABLE(S):

Sarah Bethencourt, Sioly de Orta José Corado, Robert Tovar, Loida Ponce

TITULO DEL PROYECTO

Marcadores Virales en suero y calostro de madres no inmunizadas e inmunizadas

FACULTAD A LA QUE PERTENECE

Ccs.de la Salud

ACTIVIDAD DEL ARTICULO 42 DE LA LOCTI CON LA CUAL SE RELACIONA EL PROYECTO

Ordinal 8, Aparte a

PROBLEMA DEL PROYECTO

La leche materna es la fuente perfecta de nutrición para los recién nacidos, ya que contiene cantidades apropiadas de carbohidratos, proteínas, grasas, enzimas digestivas, minerales, vitaminas y hormonas que son requeridos para su sano desarrollo, además de gran cantidad de componentes del sistema inmunitario, tanto humorales como celulares, que contribuyen a su función protectora contra infecciones por virus, bacterias y parásitos. (Graham, 2.004) Si bien es cierto, uno de los componentes del sistema inmunitario, de mayor relevancia en la constitución del calostro son las inmunoglobulinas, de las cuales hay cinco clases: IgA, IgG, IgM, IgD e IgE, la inmunoglobulina que se encuentra en mayor concentración es la IgA secretora, la cual es sintetizada localmente en las células alveolares de la glándula mamaria. En el calostro la IgA alcanza una concentración de 300 mg/mL, disminuye posteriormente hacia la segunda semana del postparto, para luego permanecer constante en la leche intermedia y madura. Además el calostro contiene componentes celulares del SI como macrófagos, polimorfonucleares, linfocitos T y B. (Riverón, 1995) Por tanto, cuando el recién nacido es alimentado con el calostro, recibe los componentes señalados y muchos otros. Estos factores contribuyen a prevenir enfermedades diarréicas durante el primer año de vida, protegen contra estados alérgicos, disminuyen la probabilidad de padecer cáncer, diabetes y ateroesclerosis, además de favorecer el crecimiento y desarrollo del sistema digestivo, sistema nervioso central y la piel, entre otros. Sin embargo, se desconoce si tales componentes protegen al neonato contra enfermedades prevenibles por vacunas como la Hepatitis B y rubéola, y, no prevenibles como VIH, Citomegalovirus (CMV), Epstein Barr (EBV) y Virus de la Hepatitis C (VHC) (Sierra, 2000, Gavilanes y col., 2002) Cabe destacar que la resistencia a las enfermedades virales, ocurre a expensas de la síntesis de anticuerpos neutralizantes generalmente de clase IgG. Es, además, esta clase de anticuerpos la que normalmente atraviesa la placenta y puede ser detectada en la sangre fetal a partir de la semana doce de la gestación; aunque la gran mayoría de esos anticuerpos pasa a la sangre fetal durante el tercer trimestre del embarazo. Se ha demostrado que los niveles de IgG en la circulación fetal o neonatal, son significativamente mayores que en la circulación materna, no ocurre lo mismo con los anticuerpos de clase IgA sintetizados en el sistema inmunitario sistémico o el de las mucosas, ya que éstos son aportados únicamente por el calostro. (López, 2002) En la leche materna se ha identificado la presencia de anticuerpos contra numerosos agentes productores de infecciones bacterianas en lactantes a los cuales se atribuye grados variables de inmunidad pasiva contra esos agentes, en las primeras etapas de la vida; sin embargo, en lo que respecta a las infecciones virales son pocos los reportes que demuestren la presencia de esos anticuerpos en calostro o evidencias que señalen el posible papel de los mismos en la inmunidad antiviral del neonato, más aún, si se toma en cuenta que existe una elevada frecuencia de infección perinatal por HBV y VIH, así como el contagio posterior con CMV, EBV, VHC y rubéola. (Van de Perre 2003, Abarca, 2003). Por tales razones, consideramos de sumo interés, investigar si los anticuerpos contra HBV, VIH, CMV, EBV y rubéola están presentes en el calostro y si sus concentraciones, isotipos y cinética son equivalentes a los encontrados en los reportes serológicos habituales.

OBJETIVOS DEL PROYECTO

Objetivo General Determinar los niveles de anticuerpos antivirales inmunes HBV y rubéola, y no inmunes contra VIH, CMV, EBV y VHC en suero y calostro de mujeres con recién nacidos a término y pre-término atendidas en el Hospital Materno Infantil ¿José María Vargas.¿ Valencia ¿ Estado Carabobo entre los años junio 2007 y junio 2009 Objetivos Específicos Determinar los niveles e isotipos de anticuerpos antivirales inmunes HBV y rubéola en suero y calostro de madres de recién nacidos a término y pre-término. Determinar los niveles e isotipos de anticuerpos antivirales no inmunes EBV, VIH, CMV y VHC en suero y calostro de madres de recién nacidos a término y pre-término. Comparar los niveles e isotipos de anticuerpos antivirales inmunes HBV y rubéola en suero y calostro de madres de recién nacidos a término y pre-término. Comparar los niveles e isotipos de anticuerpos antivirales no inmunes EBV, VIH, CMV y VHC en suero y calostro de madres de recién nacidos a término y pre-término.

ACTIVIDADES DEL PROYECTO

Población y Muestra La población estará conformada por todas las parturientas, inmunizadas o no, con recién nacidos a término o pretérmino, en edades comprendidas entre 18 y 35 años de edad que ingresen durante el período señalado al Hospital Materno Infantil ¿José María Vargas.¿ Valencia ¿ Estado. Carabobo. Criterios de inclusión Mujeres parturientas en edades comprendidas entre 18 y 35 años de edad, inmunizadas contra VBH y rubéola o con infección previa con VIH, VHC, EBV y CMV. Procedimiento Metodológico. Previo consentimiento informado se les dará a conocer los objetivos del estudio y se procederá a incluirlas en el mismo. Se mantendrá estricta confidencialidad sobre la identificación y diagnóstico de cada paciente. Los datos recolectados serán utilizados sólo para fines científicos de ésta investigación. Una vez seleccionadas las pacientes se procederá a extraerle por punción venosa 5 mL de sangre y 1 mL de calostro, estas muestras serán distribuidas en tubos de ensayo estériles, sin anticoagulante, siliconados y rotulados adecuadamente. Las muestras serán centrifugadas y conservadas a -70ºC, hasta el momento de su procesamiento. Si las muestras deben ser transportadas, se embalarán de acuerdo con las especificaciones legales relativas al envío de materiales infecciosos. (Cetóla, 2000) En las muestras a estudiar serán determinados los siguientes anticuerpos: Hepatitis B : ¿ anti-HBs: anticuerpo con especificidad frente a HBsAg. ¿ anti-HBc: anticuerpo con especificidad frente a HBcAg. ¿ IgM anti-HBc: anticuerpo de clase IgM con especificidad frente a HBcAg ¿ anti-HBe: anticuerpo con especificidad frente a HBeAg HIV: Anticuerpos totales para HIV Hepatitis C: IgG HCV Epstein Barr: IgM e IgG EBV Citomegalovirus: IgM e IgG CMV Rubéola: IgM e IgG Rubéola. Fundamento del Método de ELISA La técnica de ELISA es un ensayo inmunoenzimático cuyo nombre resulta de la asociación de las iniciales en inglés Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay. Se fundamenta en la fijación de uno de los componentes de la reacción inmunológica, antígeno o anticuerpo, a un soporte sólido con el propósito de determinar el componente complementario en una muestra dada. Esto quiere decir que la fijación de antígenos al soporte sólido se utiliza para la búsqueda de anticuerpos en una muestra dada, o por el contrario, la fijación de anticuerpos se emplea en la búsqueda de antígenos. En este caso es requisito que la muestra examinada esté en fase fluída; es decir, suero, plasma, orina, líquido cefalorraquídeo, entre otros. (Cetóla, 2000) El complejo inmunológico así formado es revelado luego por moléculas conjugadas capaces de reconocer al componente más superficial. Ese conjugado está ligado a enzimas que revelan a los inmunocomplejos al agregarle un substrato cromogénico. La positividad de la reacción inmunológica se visualiza y se cuantifica mediante medición espectrofotométrica de la intensidad del producto coloreado. (Cetóla, 2000) Las muestras de suero y calostro se procesan por igual y separadamente, estas se ponen en contacto con el antígeno HBsAg inmovilizado sobre el soporte sólido. Si las mismas contienen anticuerpos anti-HBs, éste formará un complejo con los antígenos y permanecerá unido al soporte. La fracción no unida se elimina por lavados tras lo que se agrega una antiinmunoglobulina dirigida contra determinado tipo de anticuerpo conjugada con peroxidasa. Si se produjo la reacción en la primera etapa del proceso, se unirá el conjugado. Luego de un nuevo lavado se agrega el sustrato enzimático. En los casos en que el anti-HBs esté presente en las muestras, habrá desarrollo de color celeste. La reacción se detiene con el agregado de ácido sulfúrico, con lo que el color celeste vira al amarillo. (Cetóla, 2000)

PRODUCTOS DEL PROYECTO

Este proyecto forma parte de una línea de trabajo sobre la leche humana y sus propiedades inmunitarias, sus resultados contribuirán a: 1. Enriquecer los conocimientos sobre las propiedades de la leche materna y su influencia en la salud de recién nacidos y lactantes. 2. Mejorar la formación de los profesionales de la salud en lo concerniente a la protección, promoción y apoyo a la lactancia materna, en lo referente a aspectos biomédicos, culturales, sociales y psicológicos de esta importante práctica sanitaria. 3. Mejorar el estado nutricional de los niños de los sectores más desfavorecidos de la población con la consiguiente disminución de la morbilidad y mortalidad infantil. 4. Brindar soporte a la transformación de los hospitales venezolanos en Amigos de la Madre y el Niño (UNICEF), a la creación de clínicas de lactancia materna y de bancos de leche.

DEPENDENCIA RESPONSABLE DEL PROYECTO:

OTRA (especifique)

DEPENDENCIA ESPECIFICA

Facultad de ciencias de la salud - Valencia

FECHA INICIO

15/06/2007

FECHA FIN

15/06/2010

MONTO DEL PROYECTO

Bs. 475.000.000,00, Bs.F. 475.000,00
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